Fluoro-Jade C染色的基本原理和應用

Fluoro-Jade C染色是一種用于檢測所有退化成熟神經元的熒光染色技術，包括凋亡、壞死和自噬細胞。FJC染色不依賴于細胞死亡的具體機制，因此可以用于多種

神經退行性疾病模型和腦損傷研究中。FJC染色具有高信號背景比和高分辨率，能夠定位神經細胞體的退化以及遠端樹突、軸突和末端。

實驗步驟

 1.組織切片：首先，將固定的組織切片成適當厚度。

 2.脫水和透明化：使用乙醇系列和二甲苯等試劑對組織切片進行脫水和透明化處理。

 3.染色：將切片浸入FJC染色溶液中，通常在室溫下孵育數小時至過夜。

 4.清洗：使用蒸餾水或PBS輕輕清洗切片，以去除未結合的染料。

 5.干燥：將切片在室溫下自然干燥或使用空氣吹干。

 6.封片：使用抗褪色劑（如DAPI）和封片劑封片，準備顯微鏡觀察。

 7.顯微鏡觀察：在熒光顯微鏡下觀察FJC的綠色熒光，以識別退化的神經元。

注意事項和優化建議

 1.在染色過程中，應嚴格按照制造商的說明進行，以確保染色效果。

 2.FJC染色后的切片應避免長時間暴露在強光下，以減少熒光淬滅。

 3.根據最新的研究，FJC染色可能不是特異于退化的成熟神經元，有時也可以標記非神經細胞，如激活的星形膠質細胞和微膠質細胞。因此，在解釋實驗結果時，

應考慮這些可能的非特異性標記。

 4.為了提高實驗的準確性，可以結合使用其他免疫熒光標記來鑒定特定類型的細胞。

請根據您的具體實驗條件調整上述步驟，并在實驗過程中遵循實驗室安全規程。